Genkloning: Større trin involveret i kloning af et gen
Genkloning: Større trin involveret i kloning af et gen!
"Somatisk celle nuklear overførsel" eller simpelthen "nuklear overførsel". Det kræver to slags celle. Den ene er en somatisk celle, som indsamles fra dyret, der skal klones, hvilket den mest almindelige kloningsmetode er kendt som "genetisk donor".
En somatisk celle er en hvilken som helst anden celle end en sædcelle eller ægcelle, og indeholder det komplette DNA, eller genetisk tegning, af dyret, den kom fra. Til kloningsformål opnås somatiske celler typisk ved en rutinemæssig hudbiopsi udført af en dyrlæge.
Celle der kræves til kloning er en ægcelle, som opsamles fra en kvinde af samme art (kendt som "ægdonor"). I laboratoriet udtreder en videnskabsmand og kasserer æggelcellens kerne, som er den del af cellen, der indeholder ægdonorens gener. En indsætter derefter den somatiske celle fra den genetiske donor i ægget og "sikringer" de to med elektricitet. Følgelig indeholder smeltet æg den genetiske donors DNA.
Den videnskabelige simulering af det smeltede æg aktiverer ægget og får det til at opdele som et æg ville, hvis det var befrugtet af en sædcelle i konventionel reproduktion. Det aktiverede æg placeres derefter i et dyrkningsmedium. Da celledeling fortsætter i løbet af flere dage, dannes en blastocyst (tidligt embryo).
Efter ca. en uge overfører en embryooverførselsspecialist blastocysten til en modtagende kvinde (undertiden benævnt "surrogatmor"), hvor den fortsætter med at udvikle sig. Efter en graviditet på fuld sigt giver modtageren et dyr, der i det væsentlige er identisk tvilling af den genetiske donor.
De vigtigste trin involveret i kloning af et gen er:
(i) Fremstilling af bærer-DNA (vektor DNA).
(ii) Isolering af det ønskede gen.
(iii) Indsættelse af det isolerede gen i vektoren, som resulterer i rDNA'et.
(iv) Transformation af rDNA til en egnet vært.
(v) Ekspression af rDNA, der er klonet gen.
Farvet billede 7.1 (a), (b), (c), (d) og (e) viser dannelsen af Dolly. Celler taget fra yver af et Finn Dorset-æg er placeret i en kultur med meget lave koncentrationer af næringsstoffer. Således sultes, cellerne holder op med at dele og slukker deres aktive gener.
De to celler er placeret ved siden af hinanden, og en elektrisk puls får dem til at smelte sammen som sæbebobler. En anden puls efterligner udbrud af energi ved naturlig befrugtning, spring-start celledeling. Efter ca. seks dage implanteres det resulterende embryo i livmoderen af et andet Blackface-æg.
Efter en graviditetsperiode, fødder den gravide Blackface Owe et barn Finn Dorset lam, der hedder Dolly, der er genetisk identisk med den oprindelige donor. Den man-opererede proces at ekstrahere DNA fra en værtscelle og implantere den til at fungere i en anden type celle.
