Eksperiment til at udføre grundlæggende farvning af bakterier for at overholde dens form, størrelse og arrangement

Formålet med at udføre simple grundlæggende farvning af bakterier, at observere sin form, størrelse og arrangement.

Formål:

Det er ikke muligt at observere den naturlige form, størrelse og arrangement af bakterier ved grundfarvning, da disse egenskaber forvrænges ved varmefiksering.

Desuden er nogle bakterier (f.eks. Spirilli) vanskelige at farves.

Således udføres negativ farvning af to grunde som følger:

(en) At observere den naturlige form, størrelse og arrangement af bakterier, da der ikke gøres nogen varmefiksering her.

(B) At observere disse bakterier, som er vanskelige at farves?

Princip:

Bakterieceller bærer negativ ladning på deres overflade, på grund af hvilken de er omgivet af kationer, såsom Na + og K + (Figur 5.9). Ved sur farvning anvendes en sur plet, som ioniserer i et anionisk kromogen (negativt ladet farvestof) og en kation.

De negativt ladede kromogener afstødes af overfladens negative ladninger på bakteriecellerne, på grund af hvilke farvestoffet ikke kan trænge ind i cellen. Nu er de ufarvede celler let synlige mod den farvede baggrund.

Materialer krævet:

Slides, sløjfe, sur plet (eosin / nigrosin), bouillon / plade / slant kultur af bakterier, mikroskop, nedsænkning olie.

Procedure:

1. Et objektglas rengøres ordentligt under ledningsvand, således at vand ikke forbliver som dråber på overfladen (Figur 5.10).

2. Det klæbende vand udslettes med bibulous papir og glideren lufttørres.

3. En lille dråbe af den sure plet (nigrosin / eosin) er placeret tæt på den ene ende af glideren.

4. En sløjfe steriliseres over flammen og afkøles. Aseptisk overføres en sløjfe af bakterier fra agarplade eller skrå eller en sløjfe af bakteries suspension fra en flydende bouillon til dråben af ​​plet. En suspension af bakterier i pletten fremstilles ved forsigtigt at blande bakteriernes sløjfe i dråbeflettet, således at dråben ikke spredes.

5. En anden ren glide holdes i en vinkel på 30 ° til det første objektglas, således at en smal kant af den førstnævnte berører overfladen af ​​den senere mod enden uden pletfaldet.

6. I den hældende stilling trækkes det andet objektglas frem mod pletfaldet, indtil dets kant bare rører dråbet, og dråbet bliver spredt langs kanten.

7. I den skrånende stilling skubbes det andet objektglas bagud for at danne en tynd smøring af bakterier.

8. Smøret er lufttørret. Varmebinding er ikke færdig her.

9. Glidestykket klippes til mikroskopets stadium og smøret observeres under lavt strømforbrug og højt tørre mål.

10. En dråbe nedsænkningsolie sættes på smøret.

11. Smøret er observeret under olie-nedsænkningsmål.

Observationer (Under Olieinddrivelsesmål):

1. Form af bakterier:

Sfærisk (coccus)

Stangformede (baciller)

Komma-lignende (vibrio)

Spiral (spirochetes)

2. Arrangement af bakterier:

Par (diplobacillus / diplococcus)

I fours (tetrads)

I kæder (streptokokker / streptobacillus)

Drue-lignende klynger (staphylococcus)

Cuboidal (sarkin eller oktet)

3. Størrelse af bakterier:

Ved øjeoverslag gør du tegning af feltet under olieinddrivningsmål.