Kemisk metode til lægemiddelevaluering

Bestemmelse af aktive bestanddele i et lægemiddel ved kemisk proces betegnes som kemisk evaluering.

(a) Test for alkaloider:

jeg. Mayer test:

Testprøve og tilsæt Mayer's Reagent (Kalium mercuric iodide opløsning) give cremet bundfald, Tilstedeværelse af alkaloider.

ii. Wagner test:

Testprøve og tilsæt Wagners reagens (Vandig jodopløsning) giver rødbrunt bundfald.

iii. Dragendorffs Test:

Testprøve og tilsæt Dragendorffs reagens (Kalium vismut iodid opløsning) giver rødbrunt bundfald.

iv. Hagar Test:

Testprøve og tilsæt Hager reagenser (Mættet picric acid solution) giver gul bundfald.

(b) Test for glycosider:

(i) Test for saponin glycosider:

en. Skumtest:

Ryst medikamentekstrakten eller tørpulveret kraftigt med vand. Vedvarende skum observeret.

b. Hæmolytisk test:

Tilføj lægemiddel ekstrakt eller tørt pulver til en dråbe blod placeret på glas glide. Hæmolytisk zone vises.

(ii) Test for anthraquinonglycosid:

en. Borntranger's Test:

Narkotika koges med fortyndet svovlsyre, filtreres og afkøles. Filtratet ekstraheres med chloroform eller benzen, og der tilsættes fortyndet ammoniak. Det ammoniakiske lag bliver rosa til rødt på grund af tilstedeværelsen af ​​anthraquinonederivat.

(iii) Kemiske test for hjerte glycosider:

en. Raymond test:

Til lægemidlet tilsættes et par ml 50% ethanol og 0, 1 ml 1% opløsning af m-dinitrobenzen i ethanol. Til denne opløsning tilsættes 2-3 dråber 20% natriumhydroxidopløsning. Violette farver fremkommer, det skyldes tilstedeværelse af aktiv methylengruppe.

b. Juridisk test:

Til lægemidlet tilsættes få ml pyridin og 2 dråber nitroprussid og en dråbe 20% natriumhydroxidopløsning. En dyb rød farve er produceret.

c. Killer killiani test:

Glycosid opløses i en blanding af 1% ferrinsulfatopløsning i (5%) iseddikesyre. Tilsæt en eller to dråber koncentreret svovlsyre. En blå farve udvikler sig på grund af tilstedeværelsen af ​​deoxysukker.

d. Xanthydrol test:

Råmaterialet opvarmes med 0, 1 til 5% opløsning af Xanthydrol i iseddikesyre indeholdende 1% saltsyre. En rød farve produceres på grund af tilstedeværelsen af ​​2-deoxysugar.

e. Baljet test:

Tag et stykke lamina eller tykt afsnit af bladet og tilsæt natriumpikratreagens. Hvis glycosid er til stede, vil gulv til orange farve ses.

f. Kedde test:

En opløsning af glycosider behandles med en lille mængde Kedde-reagens (Bland lige mængder af en 2% opløsning af 3, 5 dinitrobenzoesyre i mentol og en 7, 5% vandig opløsning af KOH). Udvikling af en blå eller violet farve, der falder ud om 1 til 2 timer viser den tilstedeværelse af kardinoloider.

c) Test for tanniner:

jeg. Gelatinestest:

Til en opløsning af tannin tilsættes vandig opløsning af gelatine og natriumchlorid. Et hvidt buffetfarvet bundfald dannes.

ii. Goldbeaters hudtest:

Et lille stykke guldbeholderhud (membran fremstillet af tarmens tarm) gennemblødes i 20% saltsyre, ringes med destilleret vand og anbringes i en opløsning af tannin i 5 minutter. Hudstykket vaskes med destilleret vand og opbevares i en opløsning af jernsulfat. En brun eller sort farve produceres på huden på grund af tilstedeværelsen af ​​tanniner.

d) Test for kulhydrat:

jeg. Molish test:

Til 5 ml prøveopløsning i et reagensglas tilsættes 2 dråber molish reagens (5% opløsning af α-naphthol i alkohol). Bland grundigt. Hæld røret og lad ca. 3 ml koncentreret H2SO4 strømme ned i sideventilen og derved danne et lag syre under sukkeret. En rødlig violet zone vises ved krydset mellem de to væsker.

ii. Fehling Test:

Tag Fehling-opløsning (A + B) i reagensglas, tilsæt prøveopløsning og kog. Dannelse af et bundfald af brun-rødt kobberoxid, tilstedeværelse af reducerende sukker

iii. Benedict test:

Tag prøveopløsning og tilsæt benedict reagens, bland godt, kog blandingen kraftigt i to minutter. For at producere rød, gul eller grøn farve nedbør, tilstedeværelse af reducerende sukker.

iv. Jodtest:

Prøveopløsning og tilsæt jodopløsning til frembringelse af blå tilstedeværelse af polysaccharider.

(e) Test for lipid:

jeg. Salkowski test:

Prøven opløses i chloroform og tilsættes lige store mængder koncentreret H2SO4. At producere blålig-rød til kirsebær til kirsebærrød farve

ii. Liebermann Burchard test:

Prøven opløses i chloroform i et tørt reagensglas. Tilsæt få dråber eddikesyreanhydrid og få dråber koncentreret H ₂ SO ₄ . Løsningen bliver rød, så blå og endelig blålig-grøn farve.

(f) Test for proteiner:

jeg. Biuret test:

Til 2-3 ml prøveopløsning i et reagensglas og tilsæt et lige stort volumen på 10% opløsning af NaOH, blandes grundigt og tilsæt 0, 5% opløsning af kobbersulfat dråbe pr. Dråbe blanding mellem dråbe til en purplish-violet eller lyserød violet farve er produceret.

Kvantitative kemiske metoder til evaluering:

Kvantitative fysisk-kemiske konstanter som syreværdi, iodværdi, acetylværdi, hydroxylværdi og forsæbningsværdi mv. Anvendes til fast olie og fedtstoffer.

(i) Syreværdier:

Syreværdien er antallet af mg kaliumhydroxid, der kræves for at neutralisere den frie syre i 1 g af stoffet.

Bestemmelse af syreværdi:

Væg nøjagtigt ca. 10 g af stoffet i en 250 ml kolbe, og tilsæt 50 ml af en blanding af lige mængder alkohol og opløsningsmiddelether, som er neutraliseret efter tilsætning af 1 ml opløsning af phenolphthalein.

Opvarm forsigtigt på et vandbad, indtil stoffet er fuldstændigt smeltet, titrer med 0, 1 N kaliumhydroxid, skak konstant, indtil der opnås en lyserød farve, der vedvarer i 15 sekunder. Bemærk antallet af krævede ml.

Beregn syreværdien ud fra følgende formel:

Syre værdi = økse 0.00561 x 1000 / w

a = Antal ml 0, 1 N kaliumhydroxid påkrævet

w = Vægt i g af stoffet taget.

Eksempel:

(i) Gul bier voks: 5-8

(ii) Castorolie: ikke mindre end 2

iii) Hajleverolie: Ikke over 2

(ii) Forsæbningsværdi:

Forsæbningsværdien er antallet af mg kaliumhydroxid, der kræves for at neutralisere fedtsyren, der er resultatet af fuldstændig hydrolyse af 1 g olie eller fedt.

Bestemmelse af forsæbningsværdi:

Vejer nøjagtigt ca. 2 g af stoffet i en tareret 250 ml kolbe, tilsæt 25 ml af den alkoholiske opløsning af kaliumhydroxid, tilslut en reflekskondensator og kog på et vandbad i en time, der ofte roterer indholdet af kolben. køle og tilsæt 1 ml opløsning af phenolphthalein og titrere overskuddet af alkali med 0, 5 N saltsyre.

Beregn forsæbningsværdien ud fra følgende formel:

Forsæbningsværdi = (b - a) x 0, 02805 x 1000 / w

W = Vægt i g af stoffet taget.

Eksempel:

(i) Sharkleverolie: 150-200

(ii) Linolie: 188-196

(iii) Lard: 192 til 198

iii) jodværdi:

Jodværdien er tallet, som udtrykker i gram mængden af ​​jod, som absorberes af 100 g af stoffet.

Bestemmelse af jodværdi:

Jodmonochloridmetode:

Placer stoffet, nøjagtigt vejet, i en tør jodflaske; Tilsæt 10 ml carbontrichlorid og opløs. Tilsæt 20 ml iodmonochloridopløsning. Sæt proppen, der tidligere er fugtet med opløsning af kaliumiodid, og lad stå på et mørkt sted ved en temperatur på ca. 17 ° i 30 minutter.

Tilsæt 15 ml opløsning af kaliumiodid og 100 ml vand; rystes og titreres med 0, 1 N natriumthiosulfat under anvendelse af stivelsesopløsning som indikator. Bemærk det antal ml, der kræves (a).

Samtidig udføre operationen på nøjagtig samme måde, men uden at stoffet testes, og bemærk det antal ml 0, 1 N natriumthiosulfat, der kræves (b).

Lodinværdi Syreværdi = (ba) x 0, 01269 x 100 / w

W = vægt i gm af stoffet taget

Eksempel:

(i) Olivenolie: 79-88

(ii) Arachisoil: 85-100

(iii) sesamolie: 103-116

(iv) Torskeleverolie: 155-180

(v) Arachisoil: 84-100

Acetylværdi:

Antal mg KOH kræver neutralisering af eddikesyren frigjort fra hydrolysen af ​​1 g acetyleret stof og bestemmelse af forsæbningsværdien.

Bestemmelse af acetylværdi:

acetylering:

Tag 10 g af stoffet med 20 ml eddikesyreanhydrid i en 200 ml rundbundet kolbe, refleks, opvarmning på asbest over kontrolleret flamme. Kog forsigtigt i 2 timer, koldt, hæld i 600 ml vand i et stort bægerglas, tilsæt 0, 2 g pimpstenpulver og kog i 30 minutter, afkøle, overfør til en separator.

Kassér det nederste lag. Vask det acetylerede produkt med 3 x 50 ml opvarmet mættet opløsning af NaCl og test uden syre af lakmus. Ryst endelig med 20 ml vand og fjern det vandige lag så fuldstændigt som muligt.

Hæld det acetylerede stof i en lille skål, tilsæt 1 g pulveriseret vandfrit natriumsulfat, rør grundigt og filtrér gennem et tørt plettet filterpapir. Bestem saponificeringsværdien af ​​acetyleret stof.

Acety værdi = (ba) x 1335/1335 - a

a = Saponificeringsværdi af stoffet.

b. Forsæbningsværdi af det acetylerede stof.

Hydroxylværdi:

Hydroxylværdien er antallet af milligram kaliumhydroxid, der kræves for at neutralisere syren kombineret ved acylering i 1 g af stoffet.

Bestemmelse af hydroxylværdi:

For at specificere mængden af ​​stof tilsættes 12 g stearinsyreanhydrid og 10 xylen, varmes forsigtigt under tilbagesvaling i 30 minutter, afkøles, tilsættes en blanding af 40 ml pyridin og 4 ml vand og tilbagesvales i yderligere 30 minutter. Titrer den varme opløsning med N NaOH ved anvendelse af phenolphthalein-indikator. Gentag uden stof.

Hydroxylværdien kan beregnes ud fra følgende:

Hydroxylværdi = vx 56, 11 / w

V = forskellig mellem de to titreringer

B = vægt (g) af stoffet.

Eksempel: hvedekimolie: 10-48

Ester Værdi:

Antal mg KOH krævede neutralisering af syrer som følge af fuldstændig hydrolyse af 1 g af stoffet.

Bestemmelse af esterværdi:

esterificering:

Kog en mængde på 95% ethanol for at udlede opløst CO ₂ og neutralisere med phenolphthalein.

Afvej 2 g af stoffet, opløs i 5 ml af den neutraliserede alkohol og neutraliser til 0, 1 N med alkoholholdig KOH, hvis mængde skal være mere end dobbelt så stor som det stof, der er taget. Brug 0, 2 ml phenolphthalein indikator til dette formål.

Tilsæt 25 ml alkoholisk KOH (0, 5 N), refleks i 1 time. Der tilsættes 20 ml vand og titreres overskuddet af alkali med 0, 5 N HCI under anvendelse af en yderligere mængde på 0, 2 ml phenolphthalein. Gentag proceduren uden stof.

Forskellen mellem de to opnåede titreringsværdier giver værdien for det alkali, der kræves til forsæbning af esteren.