29 Apparaturets ethvert mikrobiologiske laboratorium skal have

Målet er at studere det arbejdende princip og drift af udstyr, der anvendes i mikrobiologisk laboratorium. Et moderne mikrobiologisk laboratorium skal være udstyret med følgende udstyr.

1. varmluftovn til sterilisering:

Den bruges til sterilisering af glasvarer, såsom reagensglas, pipetter og petriskåle. Sådan tør sterilisering er kun udført for glasvarer. Flydende stoffer, som f.eks. Tilberedte medier og saltopløsninger, kan ikke steriliseres i ovnen, da de taber vand på grund af fordampning.

Glasværkerne steriliseres ved 180 ° C i 3 timer. En ovn (Figur 3.2) har en termostatstyring, hvor den ønskede konstante temperatur kan opnås ved forsøg og fejl. Termostatoplæsningen er omtrentlig, og den nøjagtige temperatur læses ved at indføre et termometer i ovnen eller på et indbygget L-formet termometer.

I en moderne ovn (Figur 3.3) er der en digital temperaturdisplay og automatisk temperaturregulator for nemt at indstille den ønskede temperatur. Tiden er indstillet af en digital timer. Efter indlæsning af glasvarer er døren lukket og ovnen tændt.

Den ønskede temperatur er indstillet. Når ovnen har nået den indstillede temperatur, indstilles den ønskede steriliseringsperiode på timeren. Ovnen slukker automatisk efter den indstillede tid. Ovnen åbnes, først efter at temperaturen ligger tæt på stuetemperatur. Ellers, hvis døren åbnes, mens indersiden af ​​ovnen stadig er meget varm, kan kold luft haste ind og knuse glasvarer.

2. Tørretovne:

Til fremstilling af visse reagenser skal glasvarer efter korrekt rengøring og skylning med destilleret vand tørres. De tørres inde i tørreovnen ved 100 ° C, indtil glaset tørrer helt op.

3. Autoklav:

Autoklave er kernen i et mikrobiologisk laboratorium. Det bruges ikke kun til sterilisering af flydende stoffer som f.eks. Tilberedte medier og saltopløsninger (opløsningsmidler), men også til sterilisering af glasvarer, når det er nødvendigt.

Det har samme arbejdsprincip som en indenlandsk trykkomfur. Den maksimale temperatur, der kan opnås ved kogende vand i en åben beholder, er 100 ° C (vandkogepunkt).

Denne temperatur er tilstrækkelig til kun at dræbe de ikke-sporerformere, men det er svært at dræbe de sporeformende bakterier ved denne temperatur, da de undgår ved dannelse af varmebestandige sporer. Det tager meget lang tid at dræbe sporerne ved denne temperatur.

På den anden side, når vand koges i en lukket beholder, på grund af øget tryk inde i det, hæves kogepunktet, og damptemperaturen meget over 100 ° C kan opnås. Denne høje temperatur er nødvendig for at dræbe alle bakterierne, herunder de varmebestandige sporeformere. Damptemperaturen stiger med stigning i damptryk (tabel 3.1).

Tabel 3.1: Temperaturer opnåelige ved forskellige damptryk:

Ved drift af en standard vertikal autoklave, (Figur 3.4) hældes tilstrækkeligt vand i det. Hvis vandet er for mindre, bliver bunden af ​​autoklaven tørret under opvarmning og yderligere opvarmning beskadiger det.

Hvis det har indbygget vandvarmeelement, (Figur 3.5) skal vandstanden holdes over elementet. På den anden side, hvis der er for meget vand, tager det lang tid at nå den ønskede temperatur.

De materialer, der skal steriliseres, er dækket af håndværkspapir og anbragt på en aluminium eller træramme, der befinder sig på autoklavens bund, ellers hvis materialerne forbliver halvt nedsænket eller flydende, tuller de under kogning, og der kan komme vand ind. Autoklaven lukkes kun fuldstændigt lufttæt, så dampudløsningsventilen er åben.

Derefter opvarmes den over flammen eller ved det indbyggede varmeelement. Luft inde i autoklaven bør få lov til at undslippe fuldstændigt gennem denne ventil. Når vanddamp ses som undslippe gennem ventilen, er den lukket.

Temperatur og tryk inde i gang øges. Trykforøgelsen observeres på trykskiven. Normalt udføres sterilisering ved 121 ° C (et tryk på 15 pund pr. Kvadrat inch, dvs. 15 psi) i 15 minutter. Den nødvendige tid regnes fra punktet, når det krævede temperaturtryk er opnået.

Når det ønskede temperaturtryk er nået, opretholdes det ved at styre varmekilden. Efter den angivne tid (15 minutter) opvarmes opvarmning og dampudløsningsventilen åbnes let. Hvis der åbnes fuldt ud øjeblikkeligt, kan væsker spildes ud af beholderne på grund af pludselige trykfald.

Efterhånden åbnes dampudløsningen mere og mere for at tillade al damp at undslippe. Autoklaven åbnes kun, når trykket falder tilbage til normalt atmosfærisk tryk (0 psi). Autoklaven skal aldrig åbnes, når der stadig er tryk inde. De varme steriliserede materialer fjernes ved at holde dem med et stykke rent klud eller asbestbelagte håndhandsker.

I tilfælde af dampkogt vandret autoklave producerer en kedel dampen (Figur 3.6). Den frigives ved et udpeget tryk ind i yderkammeret (jakke). Luft må undslippe, og dens dampudløsningsventil er lukket.

Den varme jakke opvarmer det indre kammer og derved opvarmer de materialer, der skal steriliseres. Dette forhindrer kondensering af damp på materialerne. Nu frigives damp under tryk fra jakken ind i det indre kammer, og luft får lov at flygte fra det.

Derefter er dens dampafgivelsesventil lukket. Dampen under tryk i det indre kammer når temperaturer over 100 ° C, som kan sterilisere de materialer, der holdes inde i den. Autoklaven har også automatisk lukkeanlæg, dvs. med mindre temperatur og tryk kommer ned i nærheden af ​​rumforhold, kan døren ikke åbnes.

Udover trykvælgeren har den også separat temperaturvælger for at indikere temperaturen inde i det indre kammer. Desuden opretholder autoklaven temperatur og tryk automatisk og slukker efter den indstillede steriliseringsperiode.

4. Mikrobiologisk inkubator:

En kraftig vækst af mikrober opnås i laboratoriet ved at dyrke dem ved passende temperaturer. Dette gøres ved at inokulere den ønskede mikrobe i et egnet dyrkningsmedium og inkuberer det derefter ved den optimale temperatur til dens vækst.

Inkubation udføres i en inkubator (Figur 3.7), som opretholder en konstant temperatur, der er specielt egnet til væksten af ​​en bestemt mikrobe. Da de fleste mikroorganismer, der er patogene hos mennesker, vokser voldsomt ved kropstemperaturen hos det normale menneske (dvs. 37 ° C), er den sædvanlige inkuberingstemperatur 37 ° C.

Inkubatoren har en termostat, som opretholder en konstant temperatur, indstillet efter krav. Temperaturaflæsningen på termostaten er omtrentlig. Nøjagtig temperatur kan ses på termometeret fastgjort på inkubatoren. Præcis temperatur, pr. Krav, indstilles ved at dreje termostatknappen ved forsøg og fejl og notere temperaturen på termometeret.

De fleste af de moderne inkubatorer (Figur 3.8) er programmerbare, som ikke kræver forsøgs- og fejltemperaturindstilling. Her indstiller operatøren den ønskede temperatur og den ønskede tidsperiode.

Inkubatoren opretholder det automatisk i overensstemmelse hermed. Fugt tilvejebringes ved at anbringe et bægervand i inkubatoren i vækstperioden. Et fugtigt miljø hæmmer dehydrering af medierne og derved undgår forkerte eksperimentelle resultater.

5. BOD-inkubator (lavtemperaturinkubator):

Nogle mikrober skal dyrkes ved lavere temperaturer til specifikke formål. BOD-lavtemperatur-inkubatoren (Figur 3.9), som kan holde temperaturer fra 50 ° C til så lav som 2-3 ° C, anvendes til inkubation i sådanne tilfælde.

Den konstant ønskede temperatur indstilles ved at dreje termostatens knap. Drejning af termostatknappen bevæger en nål på en drejeknap, der viser omtrentlig temperatur. Den præcise, krævede temperatur opnås ved at dreje knoppen fint ved forsøg og fejl og notere temperaturen på termometeret fastgjort på inkubatoren.

De fleste af de moderne BOD-inkubatorer (Figur 3.10) er programmerbare, som ikke kræver forsøgs- og fejltemperaturindstilling. Her indstiller operatøren den ønskede temperatur og den ønskede tidsperiode. Inkubatoren opretholder det automatisk i overensstemmelse hermed.

6. Køleskab (Køleskab):

Det tjener som opbevaringssted for termo labile kemikalier, opløsninger, antibiotika, serum og biokemiske reagenser ved køligere temperaturer og endog ved temperaturer under nul (ved mindre end 0 ° C). Lagerkulturer af bakterier opbevares også i den mellem subkulturperioder. Det bruges også til opbevaring af steriliserede medier for at forhindre deres dehydrering.

7. Køleskab:

Det bruges til at lagre kemikalier og bevare prøver ved meget lave temperaturer under nul.

8. Elektronisk Top-Pan Balance:

Den bruges til vejning af store mængder medier og andre kemikalier, hvor præcis vejning ikke er meget vigtig.

9. Elektronisk Analytisk Balance:

Det er vant til at veje små mængder kemikalier og prøver præcist og hurtigt.

10. Analysebalance med dobbelte paneler:

Det er vant til at veje kemikalier og prøver præcist. Vejning tager mere tid, som det kun bruges til i nødstilfælde.

11. Destilleret vandværk:

Vand anvendes til fremstilling af medier og reagenser. Hvis medierne fremstilles ved brug af ledningsvand, kan de kemiske urenheder, der er til stede i det, interferere med væksten af ​​mikroorganismerne i medierne. Desuden jo højere er mediernes bakterieindhold, jo længere er tiden der er nødvendig for deres sterilisering, og større er chancen for overlevelse af nogle bakterier.

Destilleret vand, men ikke bakteriefrit, indeholder mindre antal bakterier. Det er derfor; det foretrækkes ved fremstillingen af ​​mikrobiologiske medier. Det anvendes også til fremstilling af reagenser, fordi de kemiske urenheder, der er til stede i ledningsvand, kan forstyrre den korrekte funktion af reagenskemikalierne.

Da fremstilling af destilleret vand fra Liebig-kondensatoren er en tidsprosess, fremstilles den i de fleste laboratorier af 'destillerede vandplanter'. Normalt er en destilleret vandanlæg lavet af stål eller messing. Det kaldes også destilleret vand stadig.

Det har en indgang, der skal tilsluttes vandhanen og to udløb, en til destilleret vand, der skal falde ind i en beholder og den anden for strømmen ud af varmt kølevand i vasken. Den stadig er installeret på væggen. Det opvarmes af indbyggede elvarmeelementer (nedsænkningsvarmer).

Den fungerer stadig effektivt, når vandstrømmen er justeret således, at kølevandets temperatur, der strømmer ud fra den stadig i sinken, hverken er for høj eller for lav, dvs. varmt vand skal strømme ud. Det destillerede vand kan indeholde spor af metaller korroderet fra stål- eller messingbeholderen.

For at få metalfri destilleret vand anvendes glasdestillationsapparat og endnu bedre er kvartsdestillationsapparat. For et mikrobiologilaboratorium er et apparat til stål- eller glasdestillation imidlertid tilstrækkeligt. Til præcisionsanalyser anvendes dobbelt- eller tredobbeltdestilleret vand.

12. Ultrapure Vandrensningssystem:

For præcisionsanalytiske værker, nu i dage, i stedet for at bruge dobbelt- eller tredobbelt destilleret vand, anvendes mikrofiltreret vand. I tilfælde af destilleret vand er der risiko for, at få flygtige stoffer, der er til stede i vandet, bliver fordampet under opvarmning af vandet og derefter kondenseres i det opsamlede destilleret vand.

Der kan således være spor af sådanne stoffer i destilleret vand. For at overvinde dette bruges ultrapure vand. Her er vand tilladt at passere gennem meget fine mikroskopiske porer, som bevarer den mikroskopiske suspenderede partikel, herunder mikroberne.

Derefter passerer vandet gennem to kolonner af ionbytterharpikser. Anionbytterharpiksen adsorberer billeddannelserne til stede i vandet, medens billeddannelsesbytterharpiksen adsorberer anionerne. Vandet, der kommer ud, er ekstremt rent.

13. Homogenisator:

Til mikrobiologisk analyse anvendes flydende prøver direkte, mens faste prøver skal blandes grundigt med fortyndingsmidler (sædvanligvis fysiologisk saltvand) for at opnå en homogen suspension af bakterier. Denne suspension antages at indeholde bakterier homogent.

Blandingen af ​​faste prøver og fortyndingsmidler udføres ved hjælp af en homogenisator, hvori en motor roterer et pumpehjul med skarpe knive med høj hastighed inde i den lukkede homogenisatorkop indeholdende prøven og fortyndingsmidlerne. Det har en hastighedsregulator til styring af rotationshastigheden af ​​pumpehjulet.

I nogle laboratorier gøres blandingen manuelt af steriliseret stamme og mørtel. I moderne laboratorier anvendes en engangspose, inden i hvilken den faste prøve og flydende fortyndingsmidler sættes aseptisk og blandes mekanisk ved peristaltisk virkning af en maskine på posen. Denne maskine kaldes stomacher.

14. pH-meter:

En pH-meter er et instrument til bestemmelse af pH-værdien af ​​flydende medier, væskeprøver og buffere. Den har en glas-pH-elektrode. Når den ikke er i brug, skal den holdes halvt nedsænket i vand indeholdt i et lille bæger og fortrinsvis dækkes af en klokkebeholder for at undgå støvophopning i vandet og vandforløb ved fordampning.

Før brug kalibreres måleren med to standardbuffere med kendt pH. Normalt er buffere med pH 4, 0, 7, 0 og 9, 2 tilgængelige kommercielt. Instrumentet tændes og efterlades i 30 minutter for at varme op. Temperaturkalibreringsknappen roteres til temperaturen af ​​opløsningerne, hvis pH er målt.

Derefter dyppes elektroden ind i bufferen (pH 7, 0). Hvis aflæsningen ikke er 7, 00, drejes pH-kalibreringsknappen, indtil aflæsningen er 7, 00. Derefter dyppes elektroden i en anden buffer (pH 4, 0 eller 9, 2).

Hvis aflæsningen er den samme som pH for den anvendte buffer, fungerer instrumentet korrekt. Ellers aktiveres elektroden ved dypning i 0, 1 N HC1 i 24 timer. Efter kalibrering bestemmes pH af prøver ved at dyppe elektroden ind i dem og notere aflæsningen.

Hver gang, inden du dypper ind i en opløsning, skal elektroden skylles med destilleret vand. Prøverne må ikke indeholde nogen suspenderede klæbrige materialer, som kan danne en belægning på elektrodens spids og reducere dens følsomhed.

De gamle model pH-målere har dobbeltelektroder (en af ​​dem fungerer som referenceelektrode), mens nye modeller har en enkelt kombineret elektrode. For at overvinde problemet med temperaturkorrektion er nu pH-målere med automatisk temperaturkorrektion til rådighed.

Her sættes også en anden 'temperaturelektrode' i opløsningen sammen med pH-elektroden, som måler opløsningens temperatur og korrigerer automatisk indflydelsen af ​​temperaturvariationer.

Sofistikeret pH-meter har enkeltgelektrode. Sådanne elektroder har meget ringe risiko for brud, da de næsten er indesluttet i et hårdt plasthus, undtagen ved spidsen. Spidsen har både pH- og temperatursensorer.

Desuden er de nemme at vedligeholde, da de ikke kræver konstant dypning i destilleret vand, fordi elektrodespidsen lukkes med en plastikplade indeholdende mættet opløsning af kaliumchlorid, når den ikke er i brug. Imidlertid bestemmes pH ved fremstilling af mikrobiologiske medier ved hjælp af smalle pH-papirer og indstilles til den ønskede pH ved tilsætning af syrer eller alkalier efter behov.

15. varm plade:

Kogepladen bruges til at opvarme kemikalier og reagenser. Kogepladen er lavet af en jernplade, som opvarmes af et elvarmeelement nedenunder. Den nødvendige grad af opvarmning opnås af en regulator.

16. Skakvand Bad:

Nogle gange er opvarmning ved meget præcise temperaturer påkrævet. Sådanne præcise temperaturer kan ikke opnås i en inkubator eller ovn, hvor temperaturen svinger, dog lidt. Imidlertid kan præcise temperaturer opretholdes i et vandbad, hvilket giver en stabil temperatur.

Et vandbad består af en beholder indeholdende vand, som opvarmes af elvarmeelementer. Den nødvendige vandtemperatur opnås ved at øge eller formindske opvarmningshastigheden ved at dreje termostaten ved forsøg og fejl.

I et rystende vandbad opvarmes stoffet ved den ønskede temperatur og skylles konstant. Rystelse sker ved en motor, der roterer og bevæger beholderne frem og tilbage i hver rotation. Skudshastigheden styres igen af ​​en regulator. Rystelser agiterer stoffet og øger procesens hastighed.

De fleste moderne vandbad er programmerbare og behøver ikke forsøgs- og fejltemperaturindstilling. En ønsket vandtemperatur kan opretholdes over en ønsket periode ved at programmere i overensstemmelse hermed. Den anvendes til dyrkning af bakterier i bouillonmedium ved en bestemt temperatur.

17. Quebec kolonistæller:

Ved opregning af bakterier i prøver antages det, at en enkelt bakterie giver anledning til en enkelt synlig koloni, når den dyrkes på en plade af størknet næringsmedium. Ved at tælle antallet af kolonier kan antallet af bakterier i en prøve derfor estimeres.

Sommetider er kolonierne meget små og for meget overfyldte, hvilket gør det svært at tælle. Tælling bliver let, når en mekanisk håndtæller, kaldet Quebec kolonistæller (Figur 3.11), anvendes. Det deler pladen i flere firkantede opdelinger, og kolonierne forstørres 1, 5 gange med et forstørrelsesglas, hvilket gør tællingen let.

18. Elektronisk kolonistæller:

Elektronisk kolonistæller er af to typer:

(1) Håndholdt elektronisk kolonistæller og

(2) Elektronisk kolonistæller i tabellen.

Den håndholdte elektroniske koloni tæller er en pen-stil koloni tæller med en inking felt-tip markør. Til tælling af kolonier af bakterier dyrket i en petriskål, holdes den i omvendt position, således at kolonierne er synlige gennem petriskålens bundflade.

Kolonierne er markeret ved at røre glasoverfladen af ​​petriskålen med kolonistællernes felt-tip. Således er hver koloni markeret med en prik lavet af blækket af filt-spidsen på bundfladen af ​​petriskålen. I en enkelt bevægelse markerer den elektroniske kolonistæller, tæller og bekræfter med en biplyd.

Det kumulative antal kolonier vises på et firecifret LED display. I tilfælde af bordplade elektronisk kolonistæller placeres petriskålen, der indeholder bakteriernes kolonier, på et oplyst stadium, og tællebjælken er deprimeret. Det præcise antal kolonier vises øjeblikkeligt på en digital udlæsning.

19. Magnetisk omrører:

Ved fremstilling af opløsninger kræver visse kemikalier omrøring i lang tid, der skal opløses i visse opløsningsmidler. Magnetisk omrører bruges til at opløse sådanne stoffer let og hurtigt. En lille teflonbelagt magnet, kaldet 'omrøringsstang', sættes i en beholder indeholdende opløsningsmidlet og opløste.

Derefter anbringes beholderen på den magnetiske omrørers platform, under hvilken en magnet roterer ved høj hastighed af en motor. Tiltrukket af den roterende magnet roterer den teflon-belagte magnet inde i beholderen og rører indholdet. Nu opløses opløst hurtigt.

Teflonbelægningen forhindrer magneten i at reagere med opløsningen, som kommer i kontakt med den. Efter fuldstændig opløsning fjernes den teflonbelagte magnet fra opløsningen ved hjælp af en lang retriever, kaldet 'stirring bar retriever'.

20. Sonicator:

Det bruges til at bryde celler ved hjælp af højfrekvente bølger.

21. Vortex Mixer:

Det er et instrument, der anvendes til grundig blanding af væsker i reagensglas. Den har en rotor, hvis hastighed kan styres. På toppen af ​​rotoren er en skumgummi top. Når bunden af ​​et reagensglas presses på denne skumgummitoppe, begynder rotoren at dreje og derved rotere bunden af ​​reagensrøret med høj hastighed.

På grund af centripetalkraft blandes opløsningen grundigt. Det er særligt nyttigt under seriel fortynding ved opregning af bakterier, som kræver homogen suspension af bakterieceller.

21. Laminar Flow Chamber:

Det er et kammer (Figur 3.12), der anvendes til aseptisk overførsel af steriliserede materialer, såvel som til podning af mikrober. Støvpartikler flydende i lufthavmikroberne. Disse mikrobebelastede støvpartikler kan komme ind i det steriliserede medium og forurene dem, når de åbnes i korte perioder under podning af mikrobe eller overførsel fra en beholder til en anden.

For at overvinde dette, når inokuleringen udføres i fri luft, steriliseres luften af ​​det lille inokuleringsareal ved en bunsenbrænders flamme. Den opvarmede luft bliver lys og bevæger sig opad for derved at forhindre støvpartikler i at falde på mediet under den korte åbningsproces.

For yderligere at reducere risikoen for kontaminering med den mikrobelastede luft anvendes et laminært strømningskammer. Det er et glas-monteret kuleformet kammer. En luftblæser blæser luft fra omgivelserne og passerer den gennem et HEPA filter (High Efficiency Particulate Air filter) for at gøre det støvfrit (mikrofrit).

Denne mikrobefri luft passerer gennem kammeret på en laminær måde og kommer ud fra kammeret gennem den åbne dør. Denne laminære strøm af mikrobefri luft fra kammeret til udvendigt gennem den åbne dør forhindrer udvendig luft i at komme ind i kammeret.

Kammeret bliver således ikke forurenet med de mikrober, der er til stede i den ydre luft, selv om døren holdes åben under podning eller overførsel af medier. En UV-lampe monteret inde i kammeret steriliserer kammeret før drift.

Den har en rustfrit stålplatform med mulighed for gasrørforbindelse til en bunsenbrænder. Før brug rengøres og desinficeres platformen med lysol, bunsenbrænderen er tilsluttet og derefter lukkes glasdøren.

UV-lyset tændes i 10 minutter for at sterilisere miljøet inde i kammeret og derefter slukke. Glasdøren skal aldrig åbnes, når UV-lyset lyser, fordi UV-lys har skadelig virkning på hud og syn. Blæseren er tændt, og så åbnes glasdøren.

Nu er bunsenbrænderen tændt, og medietransmissionen eller inokulationen udføres i kammeret aseptisk. Hvis der skal håndteres ekstremt farlige mikrober, anvendes et laminært strømningskammer med handsker, der rager ind i kammeret fra den forreste glasdør, da der skal foretages podning med at lukke frontdøren lukket.

22. Elektronisk celletæller:

Det bruges til direkte at tælle antallet af bakterier i en given flydende prøve. Et eksempel på elektronisk celletæller er 'Coulter-tælleren'. I dette udstyr får en suspension af bakterieceller passere gennem en minutsåbning, på hvilken en elektrisk strøm strømmer.

Modstanden ved åbningen registreres elektronisk. Når en celle passerer gennem åbningen, er ikke-leder, øger den modstanden øjeblikkeligt. Antallet af gange resistens forøges kortvarigt registreres elektronisk, hvilket angiver antallet af bakterier, der er til stede i væskeprøven.

23. Membranfiltreringsapparat:

Visse stoffer som urinstof desintegrerer og mister deres oprindelige egenskaber, hvis de steriliseres ved varme. Sådanne stoffer steriliseres ved membranfiltreringsapparatur. I dette apparat filtreres opløsningen af ​​det stof, der skal steriliseres, gennem et membranfilter, som ikke tillader bakterieceller at passere ned. Filtrering sker under sugetryk for at øge filtreringshastigheden (Figur 2.19, side 30).

24. Mikroskoper:

Forskellige typer af mikroskoper anvendes til visuel observation af morfologi, motilitet, farvning og fluorescerende reaktioner fra bakterier.

25. Computere:

Computere bruges generelt til analyse af resultater. De bruges også til identifikation af bakterier nemt inden for få timer. Ellers er identifikation af bakterier en kedelig proces og tager dage sammen for at identificere en bakterieart.

De computere, der bruges til identifikation af bakterier, er Apple II, IBM PC og TRS-80 og deres moderne varianter. Hvert laboratoriepersonale skal have en computer sammen med internetfacilitet.

26. Spektrofotometer:

Det er et instrument til måling af forskellene i farveintensiteter af løsninger. En stråle af lys med en bestemt bølgelængde føres gennem testopløsningen, og mængden af ​​lysabsorberet (eller transmitteret) måles elektronisk.

Et simpelt synligt spektrofotometer kan passere lys med bølgelængder inden for synligt område, mens et UV-cum-synligt spektrofotometer kan passere lys med bølgelængder i både ultraviolet og synligt område. I mikrobiologi lab anvendes det til direkte tælling af bakterier i suspension såvel som til andre formål.

27. Elektriske enheder:

En svingning af elektrisk spænding i laboratoriet er en af ​​de vigtigste årsager, som reducerer udstyrets levetid og sommetider beskadiger dem. Derfor skal alle spændingsfølsomme udstyr forsynes med spændingsbeskyttelsesanordninger som stabilisatorer, servostabilisatorer eller konstant spændingstransformatorer (CVT) i henhold til anbefalingerne fra producenterne af udstyret.

Computere, balanceer og nogle sofistikerede udstyr skal tilsluttes via uafbrudt strømforsyning (UPS), da enhver nedbrydning i elforsyningen under deres drift kan skade nogle af deres følsomme komponenter alvorligt.

Laboratoriet skal have en højkapacitetsgenerator til at levere elektrisk strøm til hele laboratoriet i tilfælde af strømsvigt. Dette skyldes, at strømsvigt ikke blot bringer laboratorieaktiviteterne til stilstand, det medfører også uønskede irreversible ændringer i prøverne, der er opbevaret i køleskabe og køleskabe.

28. Automatiske identifikationssystem for bakterier:

Det er et instrument til automatisk computerassisteret identifikation af bakterier (figur 3.13 og 3.14). Den konventionelle metode til identifikation af bakterier er meget langvarig og besværlig.

Det drejer sig primært om farvning, motilitetstest, kulturelle karakteristika, en række biokemiske test og endelig søgning efter bakteriens navn i Bergeys Manual of Determinative Bacteriology ved at matche resultaterne med dem, der er tilgængelige i manualen. Det automatiske identifikationssystem for bakterier identificerer bakterierne på meget kort tid.

Systemet bruger, ligesom VITEK 2 (Figur 3.14) engangskort. Et kort er påkrævet til identifikation af en bakterie. Systemet kan rumme en række kort, som kan arrangeres på en kassette, hvilket gør det muligt at identificere flere bakterier ad gangen.

Hvert kort har flere rækker brønde. Normalt er der 8 rækker af 8 brønde hver (8X8 = 64 brønde). Brøndene indeholder forskellige dehydrerede medier, der kræves til forskellige biokemiske test. Et kapillarrør fastgøres til hvert kort, hvilket suger suspensionen af ​​bakterier, der skal identificeres og dispenseres i alle brøndene.

De dehydrerede medier i brøndene bliver hydreret af suspensionsvæsken og derved tillader vækst af bakterierne. Efter en foreskrevet inkuberingsperiode registreres farveændringerne i alle brøndene automatisk i systemet.

Resultaterne af farveændringerne går til en computer, der er vedhæftet systemet. Computeren sammenligner automatisk resultaterne med de tilgængelige i biblioteket for forskellige bakterier og giver endelig navnet på bakterierne med en bestemt sandsynlighed.

Til identifikation tages de givne bakterier, der vokser som isoleret koloni på en plade eller som ren kultur dyrket på en skråning. En lapful af bakterierne overføres aseptisk til steril saltopløsning i et reagensglas og en suspension af bakterierne fremstilles.

Suspensionen skal indeholde en foreskrevet tæthed af bakterier som bestemt af et densitometer. Testrøret er fastgjort til kassetten, og et kort er fastgjort nær det, således at spidsen af ​​sugekapillærrøret på kortet forbliver dybt nedsænket i suspensionen.

Flere sådanne testrør og kort er fastgjort til hver kassette afhængigt af antallet af bakterier, der skal identificeres. Kassetten sættes i systemets vakuumkammer. Et højt vakuum skabes inde i kammeret, hvilket tvinger bakteriesuspensionen til at blive suget ind i kapillærrørene og dispenseret ind i korternes brønde.

Kassetten tages ud og placeres inde i inkubations- og analysekammeret. Her skæres kapillarrørene, og de udskårne ender forsegles automatisk. Derefter starter inkubationsprocessen ved en foreskreven temperatur i en foreskreven periode, som er programmeret af kontrolpanelet. Under inkubation går hvert kort automatisk til farvelæser hvert 15. minut, som læser farveændringerne i brøndene og registrerer dem.

De registrerede resultater går til computeren, som automatisk sammenligner dem med dem, der er tilgængelige i biblioteket for forskellige bakterier. Endelig giver det bakteriernes navne med bestemte sandsynligheder. De brugte kort falder ind i systemets bortskaffelseskammer for fjernelse og endelig bortskaffelse efter sterilisering.

De berømte automatiske identifikationssystemer er VITEK 2 og API. Mens VITEK 2 arbejder på ovenstående princip, anvender API-systemet (Analytical Profile Indexing) (Figur 3.13) en lidt anden metode til automatisk identifikation af bakterier, hvilket indebærer manuel inokulation og ekstern inkubation.

29. PCR-termocykler, kølet centrifuge, ultracentrifuge, gaschromatografi (GC), højtryksvæskekromatografi (HPLC), tyndlagskromatografi (TLC), papirkromatografi, kolonnechromatografi og elektroforeseenhed:

Disse er instrumenter, der anvendes til isolering, oprensning og identifikation af biokemiske stoffer, såsom bakterielt DNA, plasmider, mikrobielle toksiner etc. Polymeraskædereaktion (PCR) er et vigtigt redskab i nukleinsyrebaserede metoder. Det er en arbejdshest i moderne mikrobiologiske og bioteknologiske laboratorier.